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    造成ELISA試劑盒實驗結(jié)果不樂觀的因素

    發(fā)布時間: 2017-03-20  點擊次數(shù): 1324次

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    樣品相關(guān)事宜解說:
    1、樣品的采集:
    (1)血漿:將全血收集到含抗凝劑的離心試管中,采集后立即離心。
    (2)血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,室溫下離心獲取血清。
    2、樣品的稀釋:在實驗時,如果血清樣品中睪酮的濃度高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品中睪酮的濃度,則應(yīng)將此樣品用零標(biāo)準(zhǔn)品稀釋10或100倍,并按實驗步驟重新檢測,在計算濃度時應(yīng)當(dāng)將此稀釋因子考慮進(jìn)去。
    3、樣品的儲存:實驗開始前,應(yīng)當(dāng)將樣品用蓋子蓋好,2-8℃環(huán)境下可穩(wěn)定存放5天,如果實驗前想要將樣品存放更長的時間,則應(yīng)將樣品凍存于-20℃的環(huán)境下,解凍的樣品在實驗前應(yīng)反復(fù)倒置幾次。

    造成ELISA試劑盒實驗結(jié)果不樂觀的因素:
    A、試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行保存,受高溫影響。
    B、試劑盒、樣品用前未平衡至室溫。
    C、加入試劑的體積和時間有誤,移液器計量不準(zhǔn),吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔。
    D、必須在有效期內(nèi)使用,超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號。
    E、孵育時間及孵育溫度未達(dá)到要求,反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調(diào)整。
    F、洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力。
    G、蒸餾水水質(zhì)有問題。
    H、洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求,洗滌沖擊力太大,浸泡時間太長。
    I、顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入。

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