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    研域詳解:血清攪擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)

    發(fā)布時間: 2019-09-26  點擊次數(shù): 1484次

    ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:

    1、外源性物質(zhì)
     
    外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標(biāo)本的采集、儲存等不妥所造成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
     
    1)標(biāo)本溶血
     
    因為各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,攪擾測定成果。
     
    2)標(biāo)本受細(xì)菌污染:因菌體中或許含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而攪擾測定成果。

    2、內(nèi)源性物質(zhì)
     
    常見的攪擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
     
    1)類風(fēng)濕因子:血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測中,可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合,然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
     
    2)補(bǔ)體:ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點被露出出來,使C1q能夠?qū)⒍哌B接起來,然后造成檢測OD值偏高。
      
    3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig(s)結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來,也能造成檢測OD值偏高。
      

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