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    研域課堂:細(xì)胞培育的一般進(jìn)程?。?!

    發(fā)布時(shí)間: 2020-04-23  點(diǎn)擊次數(shù): 1293次

    一、細(xì)胞準(zhǔn)備工作 


    準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培育基與其他試劑的制造、分裝及滅菌,無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培育箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等。 
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    二、選材 


    在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種安排細(xì)胞,通過(guò)必定的處理后接入培育器血中,這一進(jìn)程稱為選材。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有安排都可以用于培育,實(shí)際上幼體安排比成年個(gè)別的安排簡(jiǎn)單培育,分解程度低的安排比分解高的簡(jiǎn)單培育,腫瘤安排比正常安排簡(jiǎn)單培育。選材后應(yīng)立即處理,趕快培育,因故不能立刻培育時(shí),可將安排塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培育液中保存。取安排時(shí)應(yīng)嚴(yán)厲保持無(wú)菌,同時(shí)也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理安排和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時(shí)簡(jiǎn)單帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。
     

    三、培育 


    將獲得的安排細(xì)胞接入培育瓶或培育板中的進(jìn)程稱為培育。如系安排塊培育,則直接將安排塊接入培育器皿底部,幾個(gè)小時(shí)后安排塊可貼牢在底部,再加入培育基。如系細(xì)胞培育,一般應(yīng)在接入培育器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),按要求以必定的量(以每毫升細(xì)胞數(shù)表明)接入培育器皿并直接加入培育基。細(xì)胞進(jìn)入培育器皿后,立即放入培育箱中,使細(xì)胞盡早進(jìn)入成長(zhǎng)狀態(tài)。
     

    一般原代細(xì)胞培育進(jìn)入培育后有一段潛伏期,在潛伏期細(xì)胞一般不割裂,但可貼壁和游走。過(guò)了潛伏期后細(xì)胞進(jìn)入旺盛的割裂成長(zhǎng)期。細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底后要進(jìn)行傳代培育,將一瓶中的細(xì)胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培育。

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