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    現(xiàn)貨人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒的試驗方法

    發(fā)布時間: 2012-11-28  點擊次數(shù): 970次

    上海研域網(wǎng)絡有限公司專業(yè)供應各種屬ELISA試劑盒,金標試劑盒,細胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。

    人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

    試驗原理:
        NT-proBNP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NT-proBNP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將NT-proBNP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中NT-proBNP的濃度呈比例關系。

    自備材料
    蒸餾水。
    加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
    振蕩器及磁力攪拌器等。

    安全性
    避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
    實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
    不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

    人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

    操作注意事項
    試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
    實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
    不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
    使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
    洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
    底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
    加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
    按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

    操作步驟
    使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
    根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
    加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
    甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
    在450nm波長處測定各孔的OD值。

    局限
    6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

    試劑盒性能
    1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
    2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
    3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

    人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

    結 果 判 斷 與 分 析
    1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的NT-proBNP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的NT-proBNP含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
    3、檢測值范圍:0-800pg/ml
    4、敏感度: 1.0 pg/mlCholinesterase, Butyryl 膽堿酯酶 / 500U
    Chondroitin sulfate sodium salt 硫酸軟骨素 [9007-28-7] 25g
    Chorionic gonadotropin human 絨毛膜促性腺激素 [9002-61-3] 1mg
    Chromium granular 鉻粒 [7440-47-3] 100g
    Chromium(III) chloride 氯化鉻 [10025-73-7] 250g
    Chromium(III) chloride, hexahydrate 氯化鉻六水 [10060-12-5] 250g
    Chromic acid三氧化鉻 [1333-82-0] 250g
    Chromium(VI) oxide 三氧化二鉻 [1308-38-9] 250g
    Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate 硫酸鉀鉻十二水 [7788-99-0] 250g
    Chromium(III) sulfate, hydrate 硫酸鉻 [10101-53-8] 250g
     

    若需要了解試劑盒的詳細信息,詳情:謝明: 

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