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    關(guān)于Elisa實驗中動物體液采集方法分析

    發(fā)布時間: 2015-08-11  點擊次數(shù): 1077次

        Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,ELISA試劑盒重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。那么Elisa實驗中動物體液該如何采集呢,以下有上海勁馬生物分析,咨詢訂購我司產(chǎn)品。

    一、血液的采集

    常用的采血方法有割(剪)尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈(動脈)采血、股動脈(靜脈)采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。

    二、尿液的采集

    實驗動物的尿液常用代謝籠采集,也可通過其他裝置來采集。

    (一)用代謝籠采集尿液

    代謝籠用于收集實驗動物自然排出的尿液,是一種特別設(shè)計的為采集實驗動物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠,有的代謝籠除可收集尿液外,又可收集糞便和動物呼出的CO2。一般簡單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)的實驗動物,可通過其特殊裝置收集尿液。

    (二)導(dǎo)尿法收集尿液

    施行導(dǎo)尿術(shù),較適宜于犬、猴等大動物。一般不需要麻醉,導(dǎo)尿時將實驗動物仰臥固定,用甘油潤滑導(dǎo)尿管。對雄性動物,操作員用一只手握住陰莖,另一只手將陰莖包皮向下,暴露龜頭,使尿道口張開,將導(dǎo)尿管緩慢插入,ELISA試劑盒導(dǎo)尿管推進(jìn)到尿道膜部時有抵抗感,此時注意動作輕柔,繼續(xù)向膀胱推進(jìn)導(dǎo)尿管,即有尿液流出。雌性動物尿道外口在陰道前庭,導(dǎo)尿時于陰道前庭腹側(cè)將導(dǎo)尿管插入陰道外口,其后操作同雄性動物導(dǎo)尿術(shù)。

    用導(dǎo)尿法導(dǎo)尿可采集到?jīng)]有污染的尿液。如果嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作,可收集到無菌尿液。

    (三)輸尿管插管采集尿液

    一般用于要求計量單位時間內(nèi)實驗動物排尿量的實驗。剖腹后,將膀胱牽拉至腹腔外,暴露膀胱底兩側(cè)的輸尿管。在兩側(cè)輸尿管近膀胱處用線分別結(jié)扎,于輸尿管結(jié)扎處上方剪一小口,向腎臟方向分別插入充滿生理鹽水的插管,用線結(jié)扎固定插管,即可見尿液從插管滴出,可以收集。采尿過程中要用38℃熱生理鹽水紗布遮蓋切口及膀胱。

    三、骨髓的采集

    1、大鼠、小鼠骨髓的采集

    用頸椎脫臼法處死動物,剝離出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的Hank平衡鹽溶液,沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液。如果是取少量的骨髓作檢查,可將胸骨或股骨剪斷,將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上,混勻后涂片涼干即可染色檢查。

    2、大動物骨髓的采集

    狗等大動物骨髓的采集可采取活體穿刺方法。先將動物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚,然后估計好皮膚到骨髓的距離,把骨髓穿刺針的長度固定好。ELISA試劑盒操作人員用左手把穿刺點周圍的皮膚繃緊,右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入,穿入固定后,輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入,當(dāng)穿刺針進(jìn)入骨髓腔時常有落空感。狗骨髓的采集,一般采用髂骨穿刺。狗等大動物常用的骨髓穿刺點:胸骨:穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各點的中點。脛骨:穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔,防止發(fā)生氣胸。

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