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    ELISA試劑盒的準(zhǔn)確性

    發(fā)布時間: 2015-10-05  點擊次數(shù): 1134次

    ELISA方法的準(zhǔn)確性一般會用LC、LC-MS或者LC-MSMS做驗證,因為我的方法涉及到小分子藥物的衍生測定,所以液相的方法達(dá)不到回收率,請問有沒有其他的方法可以用來驗證ELISA方法的準(zhǔn)確性呢?有沒有這種可能是我的藥物衍生體系本身這種方法與液相的流動相沖突,不適合用液相去測定?

    通常用ELISA方法檢驗出來的陽性樣品,需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做確證,因為ELISA方法的存在約5%左右的假陽性。究竟用上述的哪一種方法去確證其準(zhǔn)確性,是要根據(jù)被測組分的理化性質(zhì)決定的,例如組分在300度也不能夠汽化,肯定不能用GC-MS;組分結(jié)構(gòu)中有共軛,存在 n→π躍遷,π→π躍遷,一般會用HPLC紫外檢測器;若組分具有熒光或者通過衍生化反應(yīng)可以定量產(chǎn)生具有熒光的物質(zhì),則會用HPLC熒光檢測器。以此類推,究竟用什么方法確證取決于被測組分的理化性質(zhì),而不是憑空想象。

    一是試劑本身的質(zhì)量評價,符合一定要求后才能生產(chǎn)供應(yīng);二是在臨床應(yīng)用中效果的評價。以肝炎ELISA診斷試劑為例,首先必須通過中國藥品生物制品檢定,以得到生產(chǎn)的許可。檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說明書等外,對試劑的性能,如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項檢定,通過對一系列參比品的檢測,結(jié)果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價是用該試劑對臨床樣本進(jìn)行檢測,以觀察其實際應(yīng)用價值。部臨檢中心對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作,通過質(zhì)量評價,促進(jìn)了試劑質(zhì)量的提高。

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