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    ELISA常見(jiàn)問(wèn)題和處理

    發(fā)布時(shí)間: 2016-06-06  點(diǎn)擊次數(shù): 1088次

    問(wèn)題  可能原因 解決方法
    1、無(wú)顏色  試劑孵育的時(shí)間沒(méi)有按說(shuō)明書(shū)操作。  確定生物素化抗體,連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時(shí)間是否適當(dāng)。
    2、不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑混用。 重新檢查試劑的標(biāo)簽,確準(zhǔn)所有組分都屬于正使用的試劑盒中的。不能混用不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑。
    3、漏加酶  檢查操作流程,注意不要漏加
    4、HRP酶污染了疊氮鈉  使用新配制的試劑,禁含疊氮鈉  標(biāo)準(zhǔn)品有問(wèn)題(若在標(biāo)本孔中有信號(hào)) 按說(shuō)明書(shū)檢查標(biāo)準(zhǔn)品的制備使用1瓶新標(biāo)準(zhǔn)品    
    某一容器未洗凈,殘留滅活酶物質(zhì)  
    盡可能用試劑盒內(nèi)容器,另覓一定要潔凈、可靠使用含血清的緩沖液配制/復(fù)溶抗體 重新確認(rèn)所選用的試劑    .
    漏加顯色劑A或B  
    加顯色劑后觀察一下液面高度    
    試劑配制/使用有誤  
    將實(shí)驗(yàn)重做;嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作,每次配制和使用前看清標(biāo)簽。    
    緩沖液污染  
    配制新新鮮的緩沖液    
    顯色弱  
    超過(guò)有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào)。
    檢查產(chǎn)品的有效期    
    加入試劑的體積和時(shí)間有誤
    確定所使用的每一個(gè)試劑的體積正確的和加入的時(shí)間是適當(dāng)?shù)摹? 
    試劑、樣品用前未能平衡  用前試劑、樣品置室溫平衡10分鐘左右   

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